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改进一步单管RT-PCR检测水中肠道病毒

  • 摘要: 为克服常规反转录PCR(RT-PCR)检测肠道病毒的缺点和不足,在实验基础上建立了一步单管RT-PCR检测水中的脊灰病毒,采用热裂解法提取样品中脊灰病毒的总RN A,反转录(cDNA)与PCR反应在PCR仪上一步进行,操作方法简单,中间可能污染的环节少,最大限度地减少了由环境造成的可能污染。设计合成的引物E1-E2取自多种肠病毒保守的5′非编码区核酸序列,可用于多种肠道病毒的扩增;P1-P2为脊灰病毒3个血清型的共用引物,只扩增脊灰病毒,具有较强的特异性。改进后的RT-PCR的敏感性与常规RT-PCR比有所提高,可检测到细胞培养悬液或水中10个PFU的脊灰病毒。

     

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