一步法提取RNA反转录－多聚酶链反应检测汉坦病毒RNA

摘要: 用反转录－多聚酶链反应(RT-PCR )检测汉坦病毒(Hantavirus)的基因RNA，同时与细胞分离病毒的敏感性进行比较。用异硫氛酸服一载体吸附法，一步提取汉坦病毒RNA。将脑腔接种汉坦病毒颇临死亡的乳鼠脑制成10%的悬液，并系列稀释，从1^－1’到10^－12的12梯度。结果表明，该引物能够扩增出汉坦病毒H8205株的RNA，说明汉坦病毒H8205株与76-118株在M片段上具有共同的保守序列.RT-PCR可以检测出4. 64 X 10^—3TCLD₅₀/ml的病毒，而Vero-E₆细胞只能分离检测出4.64 ×10^－2TCLD₅₀/ml，所以RT-PCR检测病毒比细胞分离检测病毒敏感。